西藏PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
發(fā)布時(shí)間:2020-04-10 04:29:57瀏覽次數(shù):2747
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PCR
實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
1 PCR 實(shí)驗(yàn)(experiment)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室,有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。
2標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)(experiment)室產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過(guò)在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。
PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)工作區(qū)域,如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng):則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析(Analyse)區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域,這是最常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的,還需增設(shè)樣品粉碎區(qū);若使用實(shí)時(shí)熒光PCR法:基因擴(kuò)增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個(gè)房間內(nèi);采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的全自動(dòng)化PCR分析儀,則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個(gè)區(qū)域,因此PCR實(shí)驗(yàn)室原則上設(shè)置五個(gè)區(qū)或四個(gè)區(qū)或三個(gè)區(qū)或二個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)。
核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)可設(shè)在一個(gè)房間內(nèi),但必須在滿(mǎn)足下列要求的前提下:
a.核酸擴(kuò)增前區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置兩個(gè)不同位置的實(shí)驗(yàn)區(qū),試劑配置在超凈工作臺(tái)中操作,樣品處理(chǔ lǐ)在生物安全柜內(nèi)操作。
b。在核酸擴(kuò)增后區(qū)使用全封閉的擴(kuò)增和檢測(cè)系統(tǒng),如實(shí)時(shí)熒光PCR儀等。
c。動(dòng)物(SPF級(jí))實(shí)驗(yàn)室每類(lèi)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級(jí)。各級(jí)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求依次為:一級(jí)最低,四級(jí)最高。每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
d.在實(shí)驗(yàn)(experiment)前后對(duì)操作控制區(qū)域和共享器具進(jìn)行清潔及消毒。動(dòng)物(SPF級(jí))實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)脊椎動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,其適用微生物范圍與同級(jí)的一般生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室相同。P2實(shí)驗(yàn)室按歸屬可分為三類(lèi):第一類(lèi)是從屬于大學(xué)或者是由大學(xué)代管的實(shí)驗(yàn)室;第二類(lèi)實(shí)驗(yàn)室屬于國(guó)家機(jī)構(gòu),有的甚至是國(guó)際機(jī)構(gòu);第三類(lèi)實(shí)驗(yàn)室直接歸屬于工業(yè)企業(yè)部門(mén),為工業(yè)技術(shù)的開(kāi)發(fā)與研究服務(wù)。
e。各區(qū)域的試劑、器具、儀器設(shè)備和設(shè)備為該區(qū)專(zhuān)用,不得交叉使用。